OxLDL plasma levels in patients with Alzheimer's disease / Níveis plasmáticos de LDL-ox em pacientes com doença de Alzheimer

ABSTRACT Objective: The objective of this study was to characterize the conventional lipid profile, oxLDL levels and ApoE polymorphism in patients with Alzheimer's disease (AD) and in elderly individuals without cognitive impairment. Methods: Eighty elderly individuals were selected and the levels of oxLDL were determined using the ELISA kit, and ApoE gene polymorphism was investigated using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism. Results: Significantly reduced levels of oxLDL were observed in patients with AD compared to the control group. A higher frequency of the ApoE ε4 allele was observed in patients with AD compared to controls. No difference was observed for total cholesterol, HDL-C, and LDL-C levels between the two groups, while triglyceride levels were higher in controls compared with patients with AD. Conclusion: The data analyzed together did not reveal significant differences in lipid profiles, including oxLDL levels. However, the importance of lipid changes in the genesis of the disease cannot be ruled out. Nevertheless, the ApoE ε4 allele was significantly more frequent in patients with Alzheimer's dementia in agreement with previous findings in the literature, but this genetic component did not change the levels of oxLDL.

RESUMO Objetivo: O objetivo deste estudo foi caracterizar o perfil lipídico convencional, os níveis de LDL-ox e o polimorfismo da ApoE em pacientes com doença de Alzheimer (DA) e em indivíduos idosos sem comprometimento cognitivo. Métodos: Foram selecionados oitenta indivíduos idosos. Os níveis de LDL-ox foram determinados usando o kit ELISA e a investigação do polimorfismo do gene da ApoE por PCR-RFLP. Resultados: Níveis significativamente reduzidos de LDL-ox foram observados em pacientes com DA comparado ao grupo controle. Uma maior frequência do alelo ε4 da ApoE foi observada nos pacientes com DA em relação aos controles. Nenhuma diferença foi observada para os níveis de colesterol total, HDL-C e LDL-C entre os dois grupos, enquanto níveis de triglicérides foram mais altos em controles comparados aos pacientes com DA. Conclusão: Os dados analisados em conjunto não revelaram diferenças significativas no perfil lipídico, incluindo os níveis de LDL-ox. No entanto, não se pode excluir a importância de alterações lipídicas na gênese da doença. Não obstante, o alelo ε4 da ApoE foi signicativamente mais frequente nos pacientes com demência de Alzheimer em concordância com achados prévios da literatura, mas esse componente genético não interferiu nos níveis de LDL-ox.

Homocysteine: validation and comparison of two methods using samples from patients with pulmonary hypertension / Homocisteína: validação e comparação entre dois métodos utilizando amostras de pacientes com hipertensão pulmonar

Introduction and objective: The determination of homocysteine plasma levels has been reported as a risk marker of interest in severe diseases involving endothelial injury and associated with the development or progression of atherosclerotic lesions and thrombus formation. The aims of this study were to validate method for quantification of plasma homocysteine by high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorimetric detection, and to compare the results obtained from patients with pulmonary hypertension by HPLC with those obtained by spectrophotometric enzymatic cycling (S-Ec) method. Materials and methods: The validation parameters, such as linearity, matrix effect, precision, accuracy, detection and quantitation limits, and robustness of the method were evaluated aiming to demonstrate that it is suitable for the intended use. The data obtained in the quantification of homocysteine using the validated method (HPLC) and the spectrophotometric enzymatic cycling (S-Ec) method, were compared. Results: The method was precise, accurate, and robust; it also had good recovery and showed no matrix effect. The linearity covered a range of 5.0-85.0 µmol/l and the limits of detection and quantification were 1.0 µmol/l and 3.4 µmol/l, respectively. The results obtained for homocysteine determination by HPLC and S-Ec methods were comparable. Conclusion: The validated HPLC method showed good performance for quantification of plasma homocysteine levels, while S-Ec method provided results for homocysteine comparable with those obtained by the validated method; therefore, this methodology is a potential alternative of automated method for clinical laboratories. .

Introdução e objetivo: A determinação dos níveis plasmáticos de homocisteína tem sido relatada como um marcador de risco de interesse em doenças graves que cursam com lesões endoteliais, estando associada ao desenvolvimento ou à progressão de lesões ateroscleróticas e formação de trombos. Os objetivos do presente estudo compreenderam validar o método de dosagem de homocisteína plasmática por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção fluorimétrica, analisar amostras de pacientes com hipertensão pulmonar e comparar os resultados obtidos por CLAE com aqueles obtidos com a metodologia espectrofotométrica enzimática cíclica (E-Ec). Materiais e métodos: Os parâmetros de validação linearidade, efeito de matriz, precisão, exatidão, limites de detecção e quantificação, além de robustez do método foram avaliados visando demonstrar que este está apropriado para o uso pretendido. Os dados obtidos na quantificação de homocisteína pelo método validado (CLAE) e pela metodologia espectrofotométrica enzimática cíclica (kit da Labtest) foram comparados. Resultados: O método mostrou-se preciso, exato, robusto, com boa recuperação e não apresentou efeito de matriz. A linearidade abrangeu a faixa de 5 a 85 µmol/l, e os limites de detecção e quantificação foram 1 µmol/l e 3,4 µmol/l, respectivamente. Quanto à comparação dos resultados da determinação de homocisteína por CLAE e por E-Ec, eles foram comparáveis. Conclusão: O método validado por CLAE apresentou desempenho adequado para mensuração dos níveis plasmáticos de homocisteína, enquanto o uso da metodologia E-Ec forneceu resultados para homocisteína comparáveis com aqueles obtidos pelo método validado, sendo esta metodologia uma opção de método automatizado para laboratórios clínicos. .

Action of a pancreatin and an Aspergillus oryzae protease on whey proteins: correlation among the methods of analysis of the enzymatic hydrolysates

The objectives of this study were to hydrolyze whey proteins using a pancreatin and an Aspergillus oryzae protease; to evaluate the degree of hydrolysis (DH) and the peptide profile; and to establish the correlations among the analytical methods. Ten hydrolysates were prepared at different reaction times and the highest DH was obtained by the protein content method. Good correlations (r > 0.87) between the methods of formaldehyde and orthophthalaldehyde (OPA), formaldehyde and osmometry as well as osmometry and OPA were observed using pancreatin. Similar results were obtained between OPA and soluble protein content for the A. oryzae protease. The action of pancreatin produced the highest contents of di- and tripeptides (9.07, 7.12 and 6.46%) and the lowest of large peptides (42.43, 41.33 and 41.13%), after 3, 4 and 5 h of hydrolysis, respectively. Using pancreatin, the DH measured by formol titration and OPA was positively correlated with medium peptide content and negatively correlated with large peptide content. For the A. oryzae protease, a strong negative correlation was observed between the large peptide content and the DH measured by the OPA method.

Aterotrombose e antiagregantes plaquetários / Atherothrombosis and antiplatelet drugs

A aterotrombose é uma doença do sistema circulatório cujas manifestações clínicas mais significativas (infarto do miocárdio e acidente vascular encefálico) representam atualmente as principais causas de mortalidade, com expectativa de que sua incidência aumente nos próximos anos. O uso clínico de antiagregantes plaquetários encontra-se firmemente consolidado como terapia de escolha na prevenção primária e secundária de eventos clínicos relacionados à aterotrombose. A presente revisão tem como objetivo realizar uma descrição dos aspectos gerais da aterotrombose e dos principais fármacos antiagregantes plaquetários, com uma descrição breve de seus aspectos farmacodinâmicos e farmacocinéticos.

Atherothrombosis is a circulatory system disease whose most significant clinical manifestations (myocardial infarction and stroke) are today the leading causes of death worldwide, expected to increase over the coming years. The clinical use of antiplatelet agents is firmly established as the therapy of choice in primary and secondary prevention of clinical events related to atherothrombosis. This review offers a description of the general aspects of atherothrombosis and the main antiplatelet drugs,with a brief outline of their pharmacodynamic and pharmacokinetic aspects.

Determinação simultânea dos ácidos hipúrico metil-hipúrico urinários por métodos cromatográficos: comparação entre cromatografia líquida de alta eficiência e cromatografia gasosa capilar / Simultaneous determination of urinary hyppuric and methylhyppuric acids through chromatographic methods: comparation between high performance liquid chromatography and capilary gas chromatography

O presente trabalho foi realizado objetivando-se comparar a eficiência de dois métodos analíticos, um por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e outro por cromatografia em fase gasosa com coluna capilar (CG), na determinação conjunta do ácido hipúrico (AH) e ácido metil-hipúrico (AMH) em urina de indivíduos expostos ocupacionalmente ao tolueno e xileno. Após a validação analítica foi observado que o método CLAE apresentou melhores precisão intra e interensaio, porcentagem de recuperação e sensibilidade. Amostras de urina de trabalhadores expostos aos dois solventes em fábrica de tintas-latex foram analisadas pelos dois métodos validados e os resultados avaliados estatisticamente...

Influência da hidrólise ácida na quantificação de 2, 5-hexanodiona em urina de indivíduos expostos ocupacionalmente ao n-hexano / Influence of acid hydrolysis in 2, 5-hexanedione quantification from the urine of individuals occupationally exposed to n-hexane

A 2,5-hexanodiona (2,5-HD) urinária tem sido o biomarcador mais utilizado no monitoramento da exposição ocupacional ao n-hexano. Vários autores relatam alterações nos níveis urinários do metabólito em função do tipo de tratamento aplicado à amostra. A legislação brasileira estabelece que a determinação da 2,5-HD urinária seja realizada por cromatografia gasosa (CG), mas não faz referência ao preparo das amostras para a análise. Com o objetivo de estudar a influência da hidrólise ácida no resultado das determinações de 2,5-HD, amostras de urina de indivíduos expostos e não-expostos ao n-hexano, foram analisadas por cromatografia em fase gasosa utilizando-se duas técnicas, respectivamente, com e sem hidrólise ácida...

Estabilidade química de alguns indicadores biológicos em amostra de urina / Chemical stability of some biological indicators in urine samples

Um dos fatores mais importantes no controle de qualidade de um laboratório de análise toxicológicas é a adequada conservaçäo e armazenamento do agente a ser analisado. O laboratório de Toxicologia da FAFAR/UFMG, ao integrar a Rede Nacional do INAMPS, preocupou-se em estudar e estabelecer o período de estabilidade química de alguns fármacos, de modo a esclarecer, adequadamente, os usuários do laboratório quanto ao tempo máximo aceitável entre a coleta e o envio da amostra ao laboratório, assim como os cuidados necessários para o seu transporte. Forma selecionados inicialmente para o trabalho o ácido tricloroacético, o ácido delta aminolevulinico e o fenol. Os dois primeiros analisados por expectrofotometria e o último por cromatografia gasosa. Os compostos mostraram-se estáveis o suficiente para, quando armazenados nas condiçöes do trabalho, serem manuseados mesmo após sete dias da coleta.

Validade de correçäo de valores de ALA-U através da densidade urinária e da concentraçäo de creatinina / Confirmation of U-ALA results through the urinary density and the creatinine content

A determinaçäo do ácido delta aminolevulínico urinário (ALA-U é um dos Indices Biológicos de Exposiçäo (IBE) mais utilizados no controle biológico da exposiçäo ocupacional ao chumbo. O ALA é geralmente determinado na urina colhida ao final da jornada de trabalho, e as variaçöes decorrentes do fluxo urinário säo corrigidas através da concentraçäo de creatinina ou da densidade urinária . O presente trabalho faz um estudo estatístico de 223 resultados de ALA-U obtidos mno Laboratório de Análises Toxicológicas da Faculdade da Faculdade de Fármacia da UFMG, procurando avaliar a validade dessas correçöes. Os resultados demonstram que näo existe diferença significativa entre os valores näo corrigidos e os corrigidos pela densidade, tornando-se desnecessária a utilizaçäo deste parâmetro como fator de correçäo das variaçöes do fluxo urinário

Otimizaçäo das condiçöes analíticas para a determinaçäo espectrofotométrica de àcido delta-aminolevulínico urinário (ALA-U) / Optimization of the analytical conditions for the spectrophotometric determination of urinary-aminolevulinic acid (U-ALA)

Procurando otimizar as condiçöes analíticas da determinaçäo de ALA-U, pelo método de TOMOKUNI & OGATA (1972)1, foi idealizado o presente trabalho. Apesar de o método analítico ser simples e fácil, algumas de suas etapas podem resultar em erros na concentraçäo de ALA-U. Assim, a possível perda ou contaminaçäo durante a fase de ciclizaçäo e de separaçäo do ALA, o papel do intervalo de tempo entre a formaçäo do produto colorido e a leitura espectro fotométrica e a importância da utilizaçäo do espectrofotômetro de duplo feixe na leitura das absorvância foram testadas e discutidas no presente trabalho